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告客戶(hù)書(shū)：買(mǎi)來(lái)的WinSera血清需要過(guò)濾嗎？
更新時(shí)間：2022-07-14　點(diǎn)擊量：893

告客戶(hù)書(shū)：買(mǎi)來(lái)的WinSera血清需要過(guò)濾嗎？

 

WinSera血清使用前是否需要過(guò)濾？

本公司血清在ISO 13485認(rèn)證的廠房中生產(chǎn)，經(jīng)過(guò)3次0.1 μm過(guò)濾，出廠經(jīng)過(guò)檢測(cè)并且會(huì)使用三種以上的細(xì)胞株進(jìn)行培養(yǎng)測(cè)試及無(wú)菌檢測(cè)，污染幾率非常非常非常低（重要的事情說(shuō)三遍）。通常細(xì)胞污染有非常多的可能性，根據(jù)協(xié)助使用者進(jìn)行分析檢測(cè)，結(jié)果表明絕大部分都是因人為操作失誤導(dǎo)致污染。

因此買(mǎi)來(lái)的血清不需要再次進(jìn)行過(guò)濾。

幾種血清的比較：

項(xiàng)目

等級(jí)

提取血清體積/只牛

成年牛血清(5-8L) > 小牛血清 (2L) > 國(guó)產(chǎn)胎牛血清 (1L) > 胎牛血清 (0.5L)

培養(yǎng)細(xì)胞的效果

胎牛血清 > 國(guó)產(chǎn)胎牛血清 > 小牛血清 > 成年牛血清

價(jià)格

胎牛血清 > 國(guó)產(chǎn)胎牛血清 > 小牛血清 > 成年牛血清

這幾種不同牛齡血清所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組分與比例不同。常規(guī)來(lái)說(shuō)，年齡越小的牛血清，細(xì)胞培養(yǎng)效果越好。胎牛血清培養(yǎng)效果好于新生牛，且因?yàn)樘ヅＮ催M(jìn)食過(guò)母乳，所以IgG含量低。故目前多數(shù)實(shí)驗(yàn)人員選擇的都是胎牛血清進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

胎牛血清成分已知的已有上千多種，以下為主要成分表：

成分

濃度

成分

濃度

蛋白和多肽

-

磷脂

0.7-3.0 mg/ml

白蛋白

20-50mg/ml

丙酮酸

2-10 ug/ml

胎球蛋白

10-20mg/ml

碳水化合物

-

纖連蛋白

1-10 ug/ml

葡萄糖

0.6-1.2 mg/ml

球蛋白

1-15 mg/ml

乳酸

0.5-2.0 mg/ml

α-抗胰蛋白酶

0.5-2.5 mg/ml

多胺

-

轉(zhuǎn)鐵蛋白

2-4 mg/ml

丁二胺,亞精胺

0.1-1.0 uM

生長(zhǎng)因子

-

尿素

170-300 ug/ml

EGF, PDGF, IGF-I, IL-1

1-100 ng/ml

無(wú)機(jī)物

-

氨基酸

 0.01-1.0 uM

鈣，氯化物，鉀，磷

-

脂質(zhì)

-

激素

-

膽固醇

10 uM

胰島素

1-100 ng/ml

脂肪酸

0.1-1.0 uM

皮質(zhì)醇

10-200 nM

亞油酸

0.01-0.1 uM

維生素 

10 ng-10 ug/ml

導(dǎo)致細(xì)胞污染的原因主要有以下幾方面：

環(huán)境：水浴鍋、培養(yǎng)箱水盤(pán)、細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)壁、超凈臺(tái)、桌面及試劑瓶身、細(xì)胞房空氣消毒。

操作：細(xì)胞復(fù)蘇、傳代、凍存等過(guò)程中也可帶入污染。

試劑：血清、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、胰酶、輔助試劑、營(yíng)養(yǎng)添加物等。

耗材：培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶、槍頭。

細(xì)胞本身：本身攜帶污染、細(xì)胞老化、分化等。


WINSERA®胎牛血清

貨號(hào)

規(guī)格

庫(kù)存狀態(tài)

優(yōu)級(jí)

FBS500-WS-002

500ML

現(xiàn)貨

特級(jí)

FBS500-WP-002

500ML

現(xiàn)貨

ES級(jí)別

FBS500-WE-002

500ML

現(xiàn)貨

無(wú)外泌體血清

FBS050-EXO

50ML

現(xiàn)貨

如何進(jìn)行污染源排查？

血清：其他試劑保持不變，僅更換血清。

基礎(chǔ)培養(yǎng)基：其他試劑保持不變，僅更換基礎(chǔ)培養(yǎng)基。

PBS：其他試劑保持不變，僅更換PBS。

胰酶：若細(xì)胞復(fù)蘇的很好，一傳代就污染，可以嘗試其他試劑保持不變，更換消化用胰酶，看細(xì)胞狀態(tài)。

細(xì)胞反復(fù)復(fù)蘇都會(huì)出現(xiàn)污染，那可保持培養(yǎng)體系不變，培養(yǎng)其他類(lèi)型且適用于此培養(yǎng)體系的細(xì)胞，觀察是否有污染出現(xiàn)。整個(gè)營(yíng)養(yǎng)體系：基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清、營(yíng)養(yǎng)添加物都可使用控制變量法進(jìn)行排查。