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細胞生長逐漸變慢是什么原因?
細胞增殖變慢有以下原因:1. 消化過度 2. 傳代過密 3.細胞營養(yǎng)不良 4.細胞頻繁傳代 5.細胞狀態(tài)不佳或老化 6.細胞存在污染。
培養(yǎng)細胞時應(yīng)使用5%或10%CO2?
一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細胞培養(yǎng)時應(yīng)使用的CO2濃度。當培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7 g時,細胞培養(yǎng)時應(yīng)使用10% CO2;當培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5 g時,則應(yīng)使用5% CO2培養(yǎng)細胞。
CO2培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?
定期(每周一次)更換水盤里面的水,水盤的水必須使用無菌蒸餾水或無菌去離子,水盤中可添加1%硫酸銅以預(yù)防霉菌污染。
細胞接種密度多少合適?
依照細胞株基本數(shù)據(jù)上的接種密度或稀釋分盤的比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長的一個重要原因。按照我們的經(jīng)驗:一般倍增時間24 h內(nèi)的細胞,傳代比率1:6-1:12為宜,倍增時間24-48 h的細胞,傳代比率1:3-1:8為宜,倍增時間超過48h的細胞, 傳代比率1:2-1:4為宜。