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細(xì)胞培養(yǎng)常見問題的解答
更新時(shí)間：2020-04-23　點(diǎn)擊量：2227

                                                 細(xì)胞培養(yǎng)常見問題的解答

1.何時(shí)須更換培養(yǎng)基？

視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定，或遵照細(xì)胞株基本資料上之更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。

2.可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？

不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無(wú)法存活。

3.如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基？

培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長(zhǎng)?？傊xMEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、 RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)好的開始。 

4.培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)應(yīng)使用5 %或10% CO2？或根本沒有影響？

一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng)，而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用的CO2濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7 g時(shí)，細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用10 % CO2；當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5 g時(shí)，則應(yīng)使用5 % CO2培養(yǎng)細(xì)胞。

5．冷凍管應(yīng)如何解凍？

取出冷凍管后，須立即放入37°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管之爆裂。

6.怎樣離心回收細(xì)胞？

欲回收動(dòng)物細(xì)胞，其離心速率一般為300xg (約1000rpm)，5 - 10分鐘，過(guò)高之轉(zhuǎn)速，將造成細(xì)胞死亡。

7.細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？

動(dòng)物細(xì)胞冷凍保存時(shí)經(jīng)常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5 - 10 %DMSO (dimethyl sulfoxide)和90 - 95 %原來(lái)細(xì)胞生長(zhǎng)用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于 DMSO稀釋時(shí)會(huì)放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中，必須使用前先行配制完成。

8.應(yīng)如何避免細(xì)胞污染？

細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無(wú)菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來(lái)源和培養(yǎng)基配制是減低污染的好方法。

9.購(gòu)買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？

研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。

10.購(gòu)買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？

研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。 培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久。

11.什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅？

酚紅在培養(yǎng)基中用作PH值的指示劑：中性時(shí)為紅色，酸性時(shí)為黃色，堿性時(shí)為紫色。研究表明，酚紅可以模擬固醇類激素的作用，（特別是雌激素）。為避免固醇類反應(yīng)，培養(yǎng)細(xì)胞，尤其是哺乳類細(xì)胞時(shí)，用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測(cè)，一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測(cè)時(shí)，不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。

蘇州千舍生物細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞明細(xì)

293(HEK-293)人胚腎細(xì)胞
5637人膀胱癌細(xì)胞
293A 人胚腎細(xì)胞
22RV1人前列腺癌細(xì)胞
293T人胚腎細(xì)胞
3T3-L1小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
4T1小鼠乳腺癌細(xì)胞
6T-CEM人T細(xì)胞白血病細(xì)胞
769-P人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞
786-O(786-0)人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞
95-D人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞
A172人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞
A2780人卵巢癌細(xì)胞
A-375人惡性黑色素瘤細(xì)胞
A-431人表皮癌細(xì)胞
A549人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
A-673人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
A9小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞
AAV-293人胚腎細(xì)胞
Acc-2人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞
ACHN人腎癌細(xì)胞
AGS人胃腺癌細(xì)胞
Ana-1小鼠巨噬細(xì)胞
Anglne人卵巢癌細(xì)胞
AR42J大鼠胰腺外分泌細(xì)胞
ARPE-19人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞
AsPC-1人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞
AtT-20小鼠垂體瘤細(xì)胞
B16小鼠黑色素瘤細(xì)胞
Bcap-37人乳腺癌細(xì)胞
BEL-7402人肝癌細(xì)胞
BEL-7404人肝癌細(xì)胞
BGC-823人胃癌細(xì)胞
BHK-21倉(cāng)鼠腎細(xì)胞
BIU-87人膀胱癌細(xì)胞
BRL 3A大鼠正常肝細(xì)胞
BNL CL.2小鼠胚胎肝細(xì)胞
BRL大鼠肝細(xì)胞
BS-C-1非洲綠猴腎細(xì)胞
BT-474人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞
BT-549人乳腺管癌細(xì)胞
BxPC-3人原位胰腺腺癌細(xì)胞
C127小鼠乳腺癌細(xì)胞
C2C12小鼠成肌細(xì)胞
C-33 A人子宮頸癌細(xì)胞
C4-2人前列腺癌細(xì)胞
C6大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞
Ca Ski人宮頸癌腸轉(zhuǎn)移細(xì)胞/人宮頸癌上皮細(xì)胞
CA46人Burkitts淋巴瘤細(xì)胞
Caco-2人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
CaES-17人食管癌細(xì)胞
Caki-1人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞
Calu-1人肺癌細(xì)胞
Calu-3人肺腺癌細(xì)胞
Caov-3人乳突狀卵巢腺癌細(xì)胞
CCD-1095Sk人乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞
L2大鼠肺泡上皮細(xì)胞
CCRF-CEM人急性淋巴白血病細(xì)胞
CFPAC-1人胰腺癌細(xì)胞
CHL倉(cāng)鼠肺細(xì)胞
CHO倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞
CHO-K1倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞亞株
CNE人鼻咽癌細(xì)胞
CoC1人卵巢癌細(xì)胞
CoC1/DDP人卵巢癌細(xì)胞CoC1順鉑耐藥亞株
COLO 205人結(jié)腸癌細(xì)胞
COLO 320DM人結(jié)腸癌細(xì)胞
COS-1非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞
COS-7非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞
CRFK貓腎細(xì)胞
CT26.WT小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞
Daudi人淋巴瘤細(xì)胞
DH82犬巨噬細(xì)胞(狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞)
DLD-1人結(jié)腸腺癌細(xì)胞
DU 145人前列腺癌細(xì)胞
EAC 小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞
Eca-109人食管癌細(xì)胞
EL4小鼠淋巴瘤細(xì)胞
ES-2人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞
WB-F344大鼠肝上皮樣干細(xì)胞
F81貓腎細(xì)胞
F9小鼠畸胎瘤細(xì)胞/小鼠胚胎癌細(xì)胞
FaDu人咽鱗癌細(xì)胞
FRhK-4恒河猴胚腎細(xì)胞
GBC-SD人膽囊癌細(xì)胞
GNM人口腔鱗癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞
H4人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞
H-4-II-E大鼠肝細(xì)胞瘤
H9c2(2-1)大鼠胚胎心肌細(xì)胞
Hacat人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞
HBL-100人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞
HBZY-1大鼠腎小球系膜細(xì)胞
HCC1937人乳腺癌細(xì)胞
HCC827人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
HCCC-9810人肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞
HCT 116人結(jié)腸癌細(xì)胞
HCT-15人結(jié)腸癌細(xì)胞
HCT-8人盲腸腺癌細(xì)胞
HEC-1-A人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞
HEC-1-B人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞
HeLa人宮頸癌細(xì)胞
Hep 3B(Hep 3B2.1-7)人肝癌細(xì)胞
Hep G2人肝癌細(xì)胞
HEp-2人喉表皮癌細(xì)胞
Hepa 1-6小鼠肝癌細(xì)胞
HFL1人胚肺成纖維細(xì)胞
HGC-27人胃癌細(xì)胞（未分化）
HIC人小腸癌細(xì)胞
HK-2人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞
HL-60人早幼粒急性白血病細(xì)胞
HL-7702(L-02)人肝正常細(xì)胞
HMy2.CIR人B淋巴母細(xì)胞
HO-8910人卵巢癌細(xì)胞
Hs 578T人乳腺癌細(xì)胞
Hs-746T人胃癌細(xì)胞
HSC-T6大鼠肝星形細(xì)胞
HT-1080人纖維肉瘤細(xì)胞
HT-29人結(jié)腸癌細(xì)胞
HuH-6人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞
HuH-7人肝癌細(xì)胞
HuT 102人T淋巴瘤細(xì)胞
HUVEC(HUV-EC-C)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞
IBRS-2豬腎細(xì)胞
IMR-32人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
J82人膀胱移行細(xì)胞癌
JAR人胎盤絨毛膜癌細(xì)胞
JEG-3人絨毛膜癌細(xì)胞
JeKo-1人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞
Jurkat, Clone E6-1人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞/人淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞
K-562人慢性骨髓性白血病細(xì)胞
KB人口腔表皮樣癌細(xì)胞
KG-1人急性骨髓性白血病細(xì)胞
KLE人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞
KU812人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞
L1210小鼠白血病細(xì)胞
L6大鼠成肌細(xì)胞
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]小鼠成纖維細(xì)胞
Lec1倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞
Li-7人肝癌細(xì)胞
LLC小鼠肺癌細(xì)胞
LLC-MK2恒河猴腎細(xì)胞
LM/TK(LMTK-)小鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞
Lncap clone FGC人前列腺癌細(xì)胞
LoVo人結(jié)腸癌細(xì)胞
LS 174T人結(jié)腸腺癌細(xì)胞
LTEP-a-2人肺腺癌細(xì)胞
MA-782小鼠乳腺癌細(xì)胞
MADB106大鼠乳腺癌細(xì)胞
MCF-7人乳腺癌細(xì)胞
MDA-MB-231人乳腺癌細(xì)胞
MDA-MB-435S人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞
MDA-MB-453人乳腺癌細(xì)胞
MDBK(NBL-1)牛腎細(xì)胞
MDCK(NBL-2)犬腎細(xì)胞
ME-180人子宮頸表皮癌細(xì)胞
MFC小鼠胃癌細(xì)胞
MG-63人骨肉瘤細(xì)胞
MGC80-3人胃癌細(xì)胞
MLTC-1小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞
MOLT-4人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞
MRC-5人胚肺成纖維細(xì)胞 
MS1小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞
MSTO-211H人肺癌細(xì)胞株
NAMALWA人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞
NCI-H1299人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
NCI-H1650人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
NCI-H292人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)
Neuro-2a[N2a]小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞
NCI-N87人胃癌細(xì)胞
NG108-15[108CC15]小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞
NIH/3T3小鼠胚胎細(xì)胞
NR8383大鼠肺泡巨噬細(xì)胞
NRK正常大鼠腎細(xì)胞
NRK-52E大鼠腎小管導(dǎo)管上皮細(xì)胞
OK負(fù)鼠腎小管細(xì)胞
OP9小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞
OS-RC-2人腎癌細(xì)胞
OVCAR-3人卵巢癌細(xì)胞
P19小鼠畸胎瘤細(xì)胞
P388D1小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞
P3X63Ag8小鼠骨髓瘤細(xì)胞
P815小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞
PA317小鼠成纖維細(xì)胞
PANC-1人胰腺癌細(xì)胞
PC-3人前列腺癌細(xì)胞
PIEC豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 
PK-15豬腎細(xì)胞
QGY-7701人肝癌細(xì)胞
Raji人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞
RAW 264.7小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞
RBE人肝膽管癌細(xì)胞
RBL-2H3大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞
RD人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞
RF/6A猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞
RH-35大鼠肝癌細(xì)胞
RKO人結(jié)腸腺癌細(xì)胞
RL95-2人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞
RM-1小鼠前列腺癌細(xì)胞
RSC96大鼠雪旺細(xì)胞
RWPE-1人前列腺上皮細(xì)胞
S-180小鼠腹水瘤細(xì)胞/小鼠肉瘤細(xì)胞
Saos-2人成骨肉瘤細(xì)胞
SCaBER人膀胱鱗癌細(xì)胞
Sf21昆蟲卵巢細(xì)胞
Sf9昆蟲卵巢細(xì)胞
SGC-7901人胃癌細(xì)胞