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細胞培養(yǎng)中的不貼壁及分化的解決辦法
如果細胞呈現(xiàn)不貼壁現(xiàn)象,且細胞根本就不能錨定的解決辦法:1、可以在鋪有瓊脂和瓊脂糖的培養(yǎng)皿上克隆細胞,也可在襯有瓊脂的甲基纖維素的非組織培養(yǎng)用平皿制備細胞克隆。2、在這些支持物中應適當添加生長因子及添加物。3、如使用組織培養(yǎng)用平皿克隆細胞,應在灌制瓊脂等支持物前鋪加飼養(yǎng)層。
如果細胞呈現(xiàn)不貼壁現(xiàn)象,但細胞能夠錨定但貼壁不佳的解決辦法:使用鋪加了甲基纖維素的組織培養(yǎng)用用培養(yǎng)皿進行細胞克隆。
細胞培養(yǎng)如果細胞不發(fā)生分化,解決辦法如下: 1、更換能夠誘導細胞分化的培養(yǎng)條件。 2、在細胞分離和傳代中使用選擇性培養(yǎng)基。
細胞培養(yǎng)中如果所養(yǎng)細胞喪失產(chǎn)物形成能力,解決辦法如下: 1、采用PCR及Northern雜交方法,檢測相關基因表達能力。 2、采用PCR及Northern雜交方法檢測報告基因和方案。 3、使用分化誘導條件。 4、在細胞分離和傳代過程中針對特定細胞使用相應的選擇培養(yǎng)基。