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解凍血清時,推薦我們總結(jié)出來的三步法(見下表),可預(yù)防沉淀發(fā)生。
不推薦血清4℃過夜融化,更不能直接將冷凍的血清放入37℃水浴或者溫箱中。因?yàn)檠逶谌诨瘯r,蛋白先融,冰塊后融,局部蛋白濃度過高,易發(fā)生沉淀。血清在解凍后,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
步驟:
溫度 100ml血清 500ml血清
一步 室溫 35分鐘 90分鐘或15-20℃水浴 5分鐘 18分鐘
第二步 20℃水浴 15分鐘 25分鐘
第三步 37℃水浴 20分鐘 35分鐘
注意:在水浴過程中,血清的液面要*浸在水中。在融化過程中要慢慢搖動,使血清混勻,但不要產(chǎn)生泡沫!